Protein AG免疫沉淀磁珠哪个公司好用 上海世途科生物科技供应

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）的实验设计通常包括以下几个关键步骤：
1. 目标蛋白质的选择： 2. 抗体的选择：选择特异性强、亲和力高的抗体来捕获目标蛋白质 3. 样本的准备：收集和准备细胞或组织样本。 4. 蛋白质的裂解和释放：选择合适的裂解条件，如pH值、离子强度、去污剂等。 5. 蛋白质浓度的测定：确定裂解液中蛋白质的浓度，以便于后续步骤的标准化。 6. 免疫沉淀的操作：将特异性抗体与裂解液混合，并在适宜的条件下孵育，以形成抗体-抗原复合物。 7. 非特异性结合的减少：通过预纯化步骤去除可能的非特异性结合蛋白。 8. 洗涤：多次洗涤以去除未结合的蛋白质和杂质。 9. 目标蛋白质的洗脱：使用适当的缓冲液洗脱抗体-抗原复合物。 10. 后续分析：对洗脱的蛋白质进行进一步分析，如Western Blot. 11. 对照实验：设计适当的正对照和负对照，以评估实验的特异性和敏感性。 免疫沉淀技术RIP实验步骤。Protein AG免疫沉淀磁珠哪个公司好用

ChIP（染色质免疫沉淀）实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验方法概述： 1. 交联：将细胞与交联剂（如1%甲醛）孵育，通常在室温下进行10-15分钟。 2. 终止交联：添加甘氨酸以终止交联反应，孵育5分钟。 3. 收集细胞：通过离心收集细胞，并用PBS洗涤以去除交联剂。 4. 细胞裂解：使用裂解缓冲液裂解细胞，释放染色质。 5. 染色质剪切：使用超声波或酶消化将染色质剪切成适当大小的片段。 6. 免疫沉淀：将剪切后的染色质与特异性抗体孵育，然后添加蛋白A/G磁珠。 7. 洗涤：用低盐、高盐和LiCl洗涤液洗涤磁珠，去除非特异性结合物。 8. 洗脱：用洗脱缓冲液洗脱DNA。 9. 逆转交联：用蛋白酶K处理，然后在65°C下加热过夜以逆转交联。 10. DNA纯化：使用商业试剂盒或标准酚/氯仿方法纯化DNA。 11. 分析：使用qPCR分析富集的DNA，或进行测序以确定蛋白质结合位点。 杭州IP免疫沉淀选磁珠还是琼脂糖珠免疫沉淀技术IP的应用有哪些？

免疫沉淀IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构  (直径 50-150 μm)  可以结合抗体  (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠 ，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。 简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。

Co-IP的优势： 1. 生理相关性：Co-IP可以在接近生理条件的条件下捕获蛋白质相互作用。 2. 特异性：使用特异性抗体可以提高实验的特异性。 3. 广泛应用：Co-IP技术适用于多种样本类型，包括细胞培养、组织样本等。 Co-IP的局限性： 1. 抗体依赖性：需要高质量的特异性抗体，否则可能得到假阳性或假阴性结果。 2. 非特异性结合：可能存在非特异性结合问题，需要仔细的实验设计和对照来控制。 3. 技术挑战：对于低丰度或弱相互作用的蛋白质，Co-IP可能面临技术挑战。 免疫沉淀技术Co-IP的实验设计。

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation，简称IP）是一种生物化学方法，它利用特异性抗体对抗原进行亲和纯化。在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的抗体以及Protein A/G-Beads（预先将Protein A/G固定结合在磁珠上），根据抗原与抗体、Protein A/G与抗体的Fc的特异性，形成“抗原-抗体-Protein A/G-Beads”复合物，清洗离心后去除溶液中未结合的杂蛋白，检测是否存在目的蛋白。 免疫沉淀技术常用于从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生物分子。它的目标是分离足够用于Western Blot或其他检测方法检测的蛋白质。 免疫沉淀技术IP的实验设计。Protein AG免疫沉淀磁珠哪个公司好用

免疫沉淀技术RIP的原理是什么？Protein AG免疫沉淀磁珠哪个公司好用

Co-IP（免疫共沉淀）技术主要用于研究蛋白质之间的相互作用，其应用场景如下： 1. 蛋白质相互作用网络的鉴定：Co-IP可用于构建蛋白质相互作用网络，发现目标蛋白的结合伙伴。 2. 信号传导途径的研究：通过Co-IP技术，科学家们发现了许多关键的细胞信号通路，如MAPK和PI3K/Akt通路等，为深入理解这些通路的功能和调控机制提供了重要线索。 3. 药物靶点筛选：利用Co-IP技术，研究人员可以筛选潜在的药物靶点。 疾病机制研究：通过分析疾病相关蛋白质的相互作用，Co-IP有助于揭示疾病的分子机制。 4. 抗体药物开发：Co-IP可用于研究抗体药物与其靶标蛋白的结合特性，评估抗体药物的亲和力和特异性。 5. 转录因子研究：Co-IP技术可以用于研究转录因子与蛋白质的相互作用，进而揭示基因调控网络。 Protein AG免疫沉淀磁珠哪个公司好用