2024-06-24 02:21:52
支原体污染的来源主要包括以下几个方面: 1. 实验室环境中可能存在支原体污染源,如空气中的尘埃、其他培养物中的支原体污染等。 2. 实验操作人员的手部、衣物或皮肤表面可能携带支原体,造成细胞培养的污染。 3. 培养基、血清等培养材料如果受到支原体污染,也会导致细胞培养物受到污染。 4. 细胞交叉污染,即使用已受污染的细胞株进行培养时,可能会污染其他细胞。 5. 实验器材带来的污染,如未彻底消毒灭菌的实验器材。 6. 人体是某些支原体的正常菌群,因此操作人员的疏失也可能成为污染源。 7. 细胞库管理不善,造成实验室间的相互污染。 8. 细胞培养过程中的细菌、酵母或霉菌污染在光学显微镜下可见,但支原体污染在光学显微镜下通常不可见,必须通过特定的检测方法进行检测 支原体检测的样本用什么合适?北京细胞支原体检测试剂
巢式PCR法和一步法恒温支原体检测试剂盒各有优缺点,具体哪个更好要根据实验需求和条件来决定。 1. 巢式PCR法通过两轮PCR扩增来提高检测的特异性和灵敏度。它的优点是: 2. 特异性强,可以减少假阳性结果。 3. 灵敏度高,可以检测到很低数量的支原体。 4. 通过设计多对引物,可以覆盖多种支原体种类。 不过巢式PCR法也存在一些缺点: 1. 操作复杂,需要两轮PCR反应。 2. 容易受到PCR抑制物的影响,产生假阴性结果。 3. 反应后需要开盖电泳检测,增加了污染的风险。 而一步法恒温支原体检测试剂盒采用等温扩增技术,具有以下优点: 1. 操作简便,只需一次反应即可完成检测。 2. 灵敏度和特异性也很高,可检出10个拷贝以上的支原体污染。 3. 反应后无需开盖,减少了污染的风险。 但一步法试剂盒的缺点是: 1. 灵敏度虽高,但可能略低于巢式PCR法。 2. 价格可能比巢式PCR试剂盒要高。 北京细胞支原体检测试剂什么样的客户需要定期检测支原体污染?
支原体检测的样本既可以是细胞,也可以是培养基。在细胞培养中,支原体污染是常见的问题,因此需要对细胞和培养基进行检测。细胞库、病毒种子批、对照细胞以及临床用细胞等都需要进行支原体检查,这通常包括培养法和指示细胞培养法(DNA染色法)。同时,病毒类疫苗的病毒收获液、原液也采用培养法检查支原体,必要时,也可以采用指示细胞培养法筛选培养基。 此外,支原体检测的培养基推荐使用支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基等,这些培养基可用于检测药品和生物制品中的支原体。在进行支原体检测时,需要取培养物样品接种到适宜支原体生长的微生物培养基或琼脂平板上。 因此,支原体检测的样本既可以是细胞,也可以是培养基,具体取决于检测的目的和方法。
支原体污染一旦发生,不仅对细胞培养造成严重影响,甚至可能导致实验结果失真。而且支原体污染在细胞培养实验中相当常见。因此,预防措施是确保细胞培养环境和实验结果可靠性的重要手段。 01/ 良好的无菌技术及实验操作,保证操作不会引入新的污染 02/ 保持实验空间的清洁 03/ 确保从可靠的来源获取细胞,减少不同细胞之间的交叉传染 04/ 防止交叉污染 05/ 减少气溶胶生成 06/ 谨慎使用抗*素 07/ 定期支原体筛查 08/ 丢弃或处理受到支原体污染的细胞 09/ 保持良好的记录 细胞培养中污染了支原体会怎么样?
细胞培养中支原体难以彻底消灭的原因主要包括以下几点: 1. 无细胞壁结构:支原体是没有细胞壁的微生物,这使得许多作用于细胞壁的抗*素对支原体无效。 2. 微小体积:支原体体积小,能够穿过常规的除菌滤膜,例如0.20微米甚至0.10微米的滤膜。 3. 隐匿性:支原体污染初期很难被察觉,它们在普通光学显微镜下几乎不可见,因此细胞被支原体污染后,前期很难被发现。 4. 传播途径多样:支原体可以通过细胞培养物、细胞悬液、细胞培养用具等途径迅速传播。 5. 污染源 :支原体污染源包括细胞间的交叉污染、操作人员的口腔、皮肤,以及细胞培养用的组分如血清、培养液等。 6. 环境因素:实验室环境、试验台、超净台、培养箱等可能被支原体污染,引起细胞的污染。 7. 抗*素耐药性:支原体可能对某些抗*素产生耐药性,使得治*效果变差。 8. 检测和清理方法的局限性:一些传统的支原体检测和清理方法可能不够灵敏或有效,导致难以彻底清理支原体 为什么要去除支原体?苏州细胞支原体去除现货
巢式PCR法和一步法恒温支原体检测试剂盒到底哪个比较好呢?北京细胞支原体检测试剂
根据提供的信息,支原体去除试剂是一种混合制剂,通过抑制DNA和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清*效果,同时对细胞无伤害。它被设计为对细胞毒性小,不影响后续的细胞实验,包括细胞活力检测和细胞转染等。这表明使用支原体去除试剂去除支原体后,理论上不应该对细胞的转染效率产生负面影响。 此外,支原体污染本身会对细胞的转染效率产生负面影响。研究表明,与未污染的细胞相比,支原体污染的细胞转染后具有较低的基因表达水平。因此,去除支原体后,可以预期细胞的转染效率会得到改善,因为移除了影响细胞正常功能的污染物。 北京细胞支原体检测试剂