苏州anti Flag免疫沉淀磁珠现货 上海世途科生物科技供应

免疫沉淀ChIP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构  (直径 50-150 μm)  可以结合抗体  (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠 ，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。 简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。 免疫沉淀技术IP的应用有哪些？苏州anti Flag免疫沉淀磁珠现货

ChIP（染色质免疫沉淀）实验是一种用于研究蛋白质与DNA相互作用的技术。以下是ChIP实验的实验设计概述： 1. 目标蛋白的选择：确定您想要研究的目标蛋白，例如特定的转录因子或组蛋白修饰。 2. 样本的准备：根据研究的需要选择合适的细胞或组织样本。 3. 抗体的选择：选择具有高特异性和亲和力的抗体，这对于实验的成功至关重要。 4. 交联：使用甲醛等交联剂将蛋白质与DNA在体内共价结合，形成稳定的蛋白质-DNA复合物。 5. 细胞裂解：裂解细胞以释放染色质，同时保持蛋白质-DNA复合物的完整性。 6. 染色质的剪切：通过超声或酶消化将染色质剪切成适当大小的片段，通常在200-1000 bp之间。 7. 免疫沉淀：使用特定抗体与目标蛋白结合，然后利用蛋白A/G磁珠沉淀复合物。 8. 洗涤和洗脱：洗涤沉淀物以去除未特异性结合的蛋白质和DNA，然后洗脱目标蛋白-DNA复合物。 9. 逆转交联：使用蛋白酶K处理样品以逆转交联，释放DNA。 10. DNA的纯化和分析：纯化DNA并使用qPCR、芯片或测序技术（如ChIP-seq）进行分析。 苏州Co IP免疫沉淀技术服务免疫沉淀技术ChIP的优缺点是什么？

Co-IP的实验步骤： 1. 细胞裂解：首先，细胞或组织被裂解，释放其中的蛋白质。 2. 抗体结合：然后，将特异性抗体（针对已知蛋白质之一的抗体）加入到裂解物中。这些抗体会特异性地结合到目标蛋白（诱饵蛋白）上。 3. 免疫复合物形成：抗体与目标蛋白结合后，形成免疫复合物。 4. 沉淀：接着，使用蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）来捕获免疫复合物。蛋白A或蛋白G能够与抗体的Fc部分结合，从而拉下抗体以及与之结合的目标蛋白和任何相关的相互作用蛋白。 5. 洗涤：捕获的免疫复合物被洗涤以去除未特异性结合的蛋白质。 6. 洗脱和分析：免疫复合物被洗脱并进行进一步的分析，如Western blot（WB）或质谱分析，以鉴定相互作用的蛋白质。

Co-IP（免疫共沉淀）技术主要用于研究蛋白质之间的相互作用，其实验设计如下： 1. 样品准备：Co-IP实验通常有两种，一种是内源性蛋白相互作用验证，一种是非内源性蛋白相互作用验证。内源性相互作用通过质粒共转染的方式将两种蛋白转染至同一细胞内表达；非内源性相互作用则是将含有靶蛋白的组织进行预处理及细胞裂解获得细胞裂解液。 2. 沉淀诱饵蛋白：利用磁珠偶联抗体沉淀诱饵蛋白。在样品中加入磁珠偶联抗体，抗体会与诱饵蛋白结合，利用磁铁将磁珠拉下，同时诱饵蛋白会一起被沉淀出来。 3. SDS-PAGE及WB检测：得到沉淀后，需要验证沉淀中是否存在相互作用蛋白。先利用SDS-PAGE将蛋白复合物分离，随后利用WB检测是否存在靶蛋白。 4. 实验对照设置：为了避免“假阳性”，需要设置正确的对照，包括阴性对照和阳性对照（Input组）。Input组为直接利用抗体对细胞裂解液进行WB检测，验证细胞裂解液中存在蛋白。 5. 结果真实性：确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的，而并非外源非特异蛋白。使用单克隆抗体有助于避免污染的发生。 免疫沉淀RIP技术选琼脂糖珠还是磁珠？

染色质免疫共沉淀（Chromatinimmunoprecipitation，ChIP）技术是目前公认的研究此相互作用的选择，是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。 它的基本原理是在活细胞状态下，固定蛋白质-DNA（染色质）复合物，并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法（抗体亲和）沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的 DNA，通过对目的片段的纯化与后期检测，从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。 这项技术通过蛋白质与DNA互作来分析目标基因活性以及已知蛋白质的靶基因，被广泛应用于体内转录调控因子与靶基因启动子上特异核苷酸序列结合方面的研究。该技术常与DNA芯片和分子克隆技术相结合。 免疫沉淀技术ChIP实验步骤。上海蛋白免疫沉淀磁珠原理

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RNA免疫沉淀技术（RIP）是一种研究RNA与蛋白质相互作用的重要方法，其应用领域主要包括： 1. 转录后调控研究：RIP技术可以帮助研究者了解RNA在转录后水平如何被调控。 2. 表观遗传调控：RIP技术用于研究RNA结合蛋白（RBPs）在表观遗传调控中的作用。 3. 非编码RNA功能研究：RIP技术可以用来研究长非编码RNA（lncRNA）、miRNA和其他小RNA的种类，以及它们如何与蛋白质相互作用来调控基因表达。 4. RNA病毒研究：RIP技术也可用于研究RNA病毒与其宿主细胞内蛋白质的相互作用，进而了解病毒复制和致病机制。 5. RNA修饰和甲基化研究：RIP技术结合其他技术如m5C-RIP-seq，可用于研究RNA甲基化修饰及其在病理过程中的作用。 6. RNA定位和稳定性：通过RIP技术，研究者可以探索特定RNA在细胞内的定位以及它们如何被稳定或降解。 7. RNA-蛋白质复合物的鉴定：RIP技术可以用来鉴定与特定RNA结合的蛋白质，从而揭示RNA-蛋白质复合物的组成。 8. 疾病相关RNA研究：RIP技术在疾病相关RNA的研究中也有应用。 苏州anti Flag免疫沉淀磁珠现货

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